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技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES一、貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞核懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞都有很多種?;铙w體內(nèi)的細(xì)胞當(dāng)離體置于體外培養(yǎng)時(shí)大多數(shù)均以貼壁方式生長(zhǎng),主要包括正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞,比如成纖維細(xì)胞,骨骼組織(骨及軟骨),心肌與平 滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,內(nèi)分泌細(xì)胞,黑色素細(xì)胞及各種腫瘤細(xì)胞等。少數(shù)細(xì)胞在體外培養(yǎng)是懸浮生長(zhǎng),包括一些取自血、脾或骨髓的培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是血液白細(xì)胞以及癌腫細(xì)胞。
二、貼壁細(xì)胞與懸浮細(xì)胞在培養(yǎng)條件上的區(qū)別貼壁細(xì)胞要加血清,不貼壁的可以不加血清。
三、貼壁細(xì)胞與懸浮細(xì)胞在培養(yǎng)方式上的區(qū)別不貼壁的一般用各種搖瓶和反應(yīng)器培養(yǎng),貼壁的一般用方瓶或孔板培養(yǎng),使用微載體時(shí)也可以用反應(yīng)器培養(yǎng)。
四、貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞在傳代方法上的不同由于貼壁細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),接觸抑制,長(zhǎng)滿一瓶后貼壁較緊,不易取出。這時(shí)必須用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶處理,使其分散開(kāi)后取出,然后在放入新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞其實(shí)也有貼壁現(xiàn)象,只是貼壁不牢。可以直接用吹打發(fā)是細(xì)胞掉落下來(lái),進(jìn)行傳代。
五、貼壁細(xì)胞與懸浮細(xì)胞在顯微鏡下的區(qū)別貼壁細(xì)胞分為兩種,上皮細(xì)胞型和成纖維細(xì)胞型,,在顯微鏡下觀察時(shí),貼壁細(xì)胞在瓶底伸展并延伸成梭型或不規(guī)則的三角形或扇形,而且晃動(dòng)培養(yǎng)液時(shí),細(xì)胞不動(dòng)。懸浮細(xì)胞漂在培養(yǎng)液中,呈圓形,晃動(dòng)培養(yǎng)液時(shí)細(xì)胞也隨著漂動(dòng)。
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